Alexander Harper Berkeley ist 1955 in New York geboren und in New Jersey aufgewachsen. Seine Leidenschaft für die Schauspielerei wurde bereits in seiner Kindheit deutlich, als er mit von seiner Mutter genähten Kostümen spielte und bei Theateraufführungen in der Schule mitwirkte.
Nach seiner abgeschlossenen Bildung zog er nach New York, um dort am Theater zu arbeiten. Den Sprung zu Film und Fernsehen schaffte er 1981 mit dem Film „Meine liebe Rabenmutter“ und einem Auftritt in der Kriegsserie M*A*S*H.
Seitdem ist Berkeley ein sehr viel beschäftigter Darsteller und kann rund 200 Projekte in seinem Lebenslauf nennen. Auf der Leinwand ist er unter anderem für seine Rollen in „Terminator 2 - Tag der Abrechnung“ (1991), „Gattaca“ (1997) und „Kiss-Ass“ (2010) bekannt.
Aber auch in der Fernsehlandschaft ist er viel vertreten. Neben zahlreichen Gastauftritten ist er Zuschauern besonders als George Mason aus der Kultserie 24 in Erinnerung. Von 2010 bis 2012 als Percy in der Agentenserie Nikita zu sehen. Des Weiteren ist er als Sunchronsprecher tätig und in diversen Cartoonserien zu hören.
2016 übernimmt er eine Hauptrolle in der Serie The Walking Dead als Gregory.
Seit 2002 ist Berkeley mit Schauspielkollegin Sarah Clarke verheiratet, die er am Jahr zuvor bei den gemeinsamen Dreharbeiten zu 24 kennen gelernt hatte. Die beiden leben mit ihren zwei gemeinsamen Töchter in Los Angeles.