Margo Martindale gewann drei Emmys, einen für Justified und zwei für ihre Gastrolle als sowjetische Führungsoffizierin in The Americans. In BoJack Horseman spielte sie sich selbst als Charakterdarstellerin, die auf die schiefe Bahn gerät.
Margo Martindale wuchs in Jacksonville im Osten von Texas auf, als jüngstes von drei Kindern. An der Schule spielte sie Golf, war Cheerleaderin und stand auf der Bühne, 1969 wurde sie zur Miss Jacksonville High School gekürt. Ihr Bruder Billy Martindale machte sich später als Architekt von Golfplätzen einen Namen.
Nach dem Lon Morris College studierte sie an der University of Michigan. Danach zog es sie nach New York, wo sie sich über viele Jahre als Theaterschauspielerin einen Namen machte, bevor Film und Fernsehen sie entdeckten.
Ihren ersten großen Filmauftritt hatte Martindale in „Lorenzo's Oil“ (1992). Sie spielte die Mutter eines schwer kranken Jungen, die sich wie die Hauptfiguren um ihr Kind kümmert. Damit begann eine lange Reihe von Nebenrollen, in denen sie Müttern, Nachbarinnen und Frauen vom Land ihren eigenen Ton gab.
Es folgten Filme wie „Nobody's Fool“ (1994) und „Dead Man Walking“ (1995). In „Million Dollar Baby“ (2004) von Clint Eastwood spielte sie die herzlose Mutter der Boxerin Maggie, die vom Erfolg der Tochter vor allem Geld erwartet.
2004 kehrte sie an den Broadway zurück und spielte Big Mama in „Cat on a Hot Tin Roof“. Für diese Rolle wurde sie für einen Tony nominiert.
Den Durchbruch beim Fernsehpublikum brachte ihr die zweite Staffel von Justified (2011). Martindale spielte Mags Bennett, die Matriarchin eines Clans in Kentucky, die mit selbst gebranntem Schnaps und Marihuana Geschäfte macht und ihre Söhne mit harter Hand führt. Für die Rolle erhielt sie 2011 den Emmy als beste Nebendarstellerin in einer Dramaserie.
Davor war sie unter anderem in The Good Wife als Wahlkampfberaterin Ruth Eastman zu sehen. Nach Justified spielte sie in der CBS-Sitcom The Millers (2013-2014) eine frisch geschiedene Mutter, die bei ihrem Sohn einzieht, gespielt von Will Arnett.
In The Americans (2013-2018) übernahm Martindale die Rolle der Claudia, Führungsoffizierin zweier sowjetischer Spione, die als Ehepaar in einem Vorort von Washington leben. Claudia ist mütterlich und eiskalt zugleich. Für diese Gastrolle gewann sie 2015 und 2016 jeweils den Emmy.
Parallel dazu war sie in Sneaky Pete (2015-2019) als Großmutter Audrey zu sehen, die eine Kautionsfirma führt. In der Zeichentrickserie BoJack Horseman sprach sie eine Version ihrer selbst, die als Charakterdarstellerin auf die schiefe Bahn gerät.
Im Kino stand sie in „August: Osage County“ (2013) neben Meryl Streep als resolute Tante Mattie Fae vor der Kamera. In der Horrorkomödie „Cocaine Bear“ (2023) spielte sie eine Parkrangerin, die mit einem Bären auf Drogen fertigwerden muss.
In Mrs. America (2020) verkörperte sie die Politikerin Bella Abzug, in Impeachment: American Crime Story (2021) die Literaturagentin Lucianne Goldberg. Für Netflix spielte sie in The Watcher (2022) die Nachbarin Maureen und in Mrs. Davis (2023) eine Mutter Oberin.
2025 sprach sie im Animationsfilm „The Twits“ die bösartige Mrs. Twit nach dem Kinderbuch von Roald Dahl. Für 2026 steht sie für eine Neuauflage von Prison Break vor der Kamera.
In der Netflix-Miniserie The Age Of Innocence übernimmt Martindale die Rolle der Mrs. Manson-Mingott. Die Matriarchin der Familie Mingott ist lebenslustig, eigensinnig und gierig und steht als Großmutter zu ihrer Enkelin Ellen Olenska, als die aus Europa zurückkehrt.
Ihre Enkelinnen spielen Camila Morrone und Kristine Froseth. Die acht Episoden erscheinen am 18. Februar 2027.
Seit 1986 ist Martindale mit Bill Boals verheiratet, die beiden haben eine Tochter. Die Familie lebt in Manhattan und verbringt freie Tage in ihrem Haus in Kent im US-Bundesstaat Connecticut.
Das Haus fanden sie, nachdem sie in Kent einmal zum Frühstück eingekehrt waren und beide sofort das Gefühl hatten, angekommen zu sein. Jahre später schlug ihr Mann ausgerechnet an ihrem Geburtstag vor, dort nach einem Haus zu suchen.