Ashley Madekwe ist in London auf die Welt gekommen, doch in ihren Adern fließt neben britischem auch nigerianisches und schweizer Blut. Sie genoss sowohl eine Schauspielausbildung an der BRIT School, als auch an der Royal Academy of Dramatic Art. Bereits während ihrer Ausbildung übernahm sie Rollen am Theater, wie beispielsweise in „King Henry V“. Neben dem Schauspielen absolvierte sie außerdem eine Ausbildung in traditionellen Tänzen und Flamenco.
Im Jahr 1999 gab Ashley Madekwe ihr Debüt in einer Episode der britischen Krimiserie The Bill (1999), worauf eine Nebenrolle in dem TV-Spielfilm „Storm Damage“ (2000) folgte. Weitere Bildschirmerfahrung sammelte sie in Gastrollen in Hope & Glory und The Neighbors (beide 2000). Anschließend übernahm sie eine wiederkehrende Rolle in der Dramedy Teachers (2001-02), verschwand dann aber zunächst vom Fernsehbildschirm. Erst vier Jahre später erschien sie wieder in verschiedenen Gastrollen wie in Doctors, Vital Signs und Casualty (alle 2006).
Auf der großen Leinwand war Madekwe neben Schauspiellegende Peter O'Toole in der Romanze „Venus“ (2006) mit von der Partie, stand für den TV-Spielfilm „Heißer Verdacht - Das Finale“ (2006) neben Helen Mirren vor der Kamera, sowie neben Ewan McGregor und Collin Farrell in Woody Allens Krimi „Cassandras Traum“ (2007). Es folgte eine wiederkehrende Rolle in der Drama-Serie Drop Dead Georgeous (2007), eine Nebenrolle in dem TV-Drama „West 10 LDN“ und ein Gastauftritt in der erfolgreichen britischen Krimiserie Trial & Retribution (beide 2008). Eine reguläre Rolle übernahm die Darstellerin in der BBC Three-Sitcom Trexx and Flipside (2008), die allerdings nach der ersten Staffel abgesetzt wurde.
Einen weiteren Ausflug auf die große Leinwand unternahm Ashley Madekwe in der romantischen Komödie „New York für Anfänger“ (2008), in dem ebenfalls Gillian Anderson und Megan Fox mit von der Partie waren. Danach widmete sie sich wieder dem Fernsehen und erschien in Kommissar Wallander (2008), Coming Up (2009) und ergatterte eine wiederkehrende Rolle als Bambi in der Drama-Serie Secret Diary of a Call Girl (2008-10) - vor allem in der dritten Staffel hatte Madekwe einen großen Handlungsbogen.
Anschließend übernahm Ashley Madekwe ihre erste Rolle in einer US-Produktion: In der Serie The Beautiful Life: TBL (2009) wohnte sie unter anderem mit Misha Barton in einer New Yorker Model-WG. Doch die Wohngemeinschaft war nur von kurzer Dauer, nach nur fünf produzierten und zwei ausgestrahlten Episoden setzte The CW die Serie ab. Madekwe übernahm dann wieder Rollen in ihrem Heimatland und war im vergangenem Jahr in der TV-Komödie „Above Their Station“ (2010) zu sehen und ergatterte kurz darauf eine der Hauptrollen in der Horror-Serie Bedlam (2011), in der sie Molly Lucas, einen der Bewohner der ehemaligen Irrenanstalt porträtiert, die sich mit den Geistern des Hauses auseinandersetzen müssen.
Den großen Coup landete Ashley Madekwe mit der Rolle von Ashley Davenport in der erfolgreich gestarteten ABC-Serie Revenge (2011), in der sie bis 2013 eine Freundin der Rächerin (Emily VanCamp) porträtierte - Serienschöpfer Mike Kelley, der auch hinter The Beautiful Life: TBL stand, schrieb ihr die Rolle auf den Leib. Für eine Hauptrolle in dem britischen Actionfilm „Victim“ (2011) stand die Darstellerin nebenbei vor der Kamera.
2014 übernahm die Darstellerin eine Hauptrolle in der Mysteryserie Salem, in der sie für zwei Staffeln die Figur Tituba porträtierte.
Im Juni 2012 heiratete Madekwe ihren langjährigen Freund, den Schauspieler Iddo Goldberg, der wie sie eine Hauptrolle in Secret Diary of a Call Girl sowie in Salem spielte.
Neben ihrer Schauspielkarriere schreibt Ashley Madekwe einen Mode-Blog, der laut des Look Magazines zu den Top-Modeblogs gehört.