Khandi Alexander erlangt große Bekanntheit durch ihre Rolle in Emergency Room (1994-2009), wo sie von 1995 bis 2001 als Dr. Bentons Schwester Jackie auftritt. Diese Rolle bringt ihr breite Anerkennung ein und verankert sie fest im Bewusstsein des Fernsehpublikums. Einen weiteren Karrierehöhepunkt erreicht sie mit ihrer Rolle in CSI: Miami (2002-2012), wo sie als Gerichtsmedizinerin Alexx Woods zwischen 2002 und 2009 eine zentrale Figur darstellt. Ihre Fähigkeit, in unterschiedlichen Genres und Rollen zu überzeugen, wird durch ihre Darstellung in Treme (2010-2013) unterstrichen, wo sie als Barbesitzerin LaDonna Batiste-Williams brilliert. Diese Serie, die sich mit den Nachwirkungen von Hurrikan Katrina in New Orleans auseinandersetzt, zeigt ihre Fähigkeit, komplexe Charaktere in schwierigen Situationen darzustellen.
Von 2014 bis 2018 ist sie als Mutter der Hauptfigur Olivia Pope regelmäßig in der Serie Scandal zu Gast.
Neben ihrer erfolgreichen Fernsehkarriere spielt Khandi Alexander auch in mehreren Filmen mit, die ihre Vielseitigkeit als Schauspielerin demonstrieren. In „There's Something About Mary“ (1998) übernimmt sie eine kleinere, aber denkwürdige Rolle, die ihre komödiantischen Fähigkeiten zeigt. Eine weitere bemerkenswerte Leistung erbringt sie in „Patriots Day“ (2016), einem Film, der sich mit den Ereignissen rund um den Bombenanschlag beim Boston-Marathon beschäftigt. Auch in „Menace II Society“ (1993) liefert sie eine beeindruckende Darstellung, die ihre Fähigkeit unterstreicht, intensive und emotionale Rollen zu übernehmen. Ihre Filmrollen ergänzen ihre Fernsehauftritte und zeigen ihre breite Palette als Schauspielerin.
Vor ihrer Schauspielkarriere ist Khandi Alexander als Tänzerin und Choreografin tätig, was ihre künstlerische Vielseitigkeit verdeutlicht. Sie arbeitet mit Größen wie Whitney Houston zusammen und choreografiert mehrere ihrer Tourneen.