Sean Pertwees Passion für die Schauspielerei kann einfach erklärt werden, immerhin wurde er eine Familie geboren, die zum britischen Schauspieladel gezählt wird. Schon sein Vater pendelte erfolgreich zwischen den großen Bühnenstücken und der Fernsehkamera, um genau zu sein, als dritte Inkarnation des Doktors in der Serie Doctor Who. Auch Sean Pertwee selbst spielt mal einen Shakespeare, spricht anschließend Audiotakes für das Computerspiel „Killzone 2“ ein und zieht weiter, um die Hauptrolle in der FOX-Serie Gotham zu spielen.
Sean Pertwee kann auf eine lange und abwechslungsreiche Karriere zurückblicken.
Als Spross einer Schauspieldynastie wusste der junge Sean Pertwee direkt wo er hinwollte: nach einer Ausbildung an der Bristol Old Vic Theatre School, schloss er sich der Royal Shakespeare Company an.
Erste Schritte vor der Kamera machte der gut Zwanzigjährige unter anderem für die britischen Serien „Hard Cases und Chances“. Neben seinen Bühnenengagements und den damit verbundenen Touren findet er Zeit, kleinere bis mittlere Rollen in Film und Fernsehen zu übernehmen. Dabei wird er in britischen Produktionen oft als typisch Deutscher besetzt, zum Beispiel spielt er einen deutschen Touristen in dem Film „London schafft alle“ (1991) und einen Gestapo-Offizier in dem Film „Swing Kids“ (1993).
Den Schritt in die USA nimmt er quasi nebenbei. Im Jahr 1997 fällt er in einer größeren Rolle in dem Sci-Fi-Film „Event Horizon“ auf, zwei Jahre später lässt er für den Hallmark-Film „Cleopatra“ Marcus Brutus aufleben.
Seine Filmografie liest sich bunt, für die BBC schlüpft er in die Rolle von „MacBeth“, für die Produzenten von „Hellraiser - Das Schloss zur Hölle“ ist er eine Idealbesetzung in dem Horrorfilm „Dog Soldiers“ (2002). 2001 legt er einen längeren Aufenthalt in der Comedyserie Cold Feet ein, kurz darauf startet sein zweite Karriere als Sprecher für Videospiele so richtig durch.
Es folgen verschiedene Filmrollen, so ist er unter anderem in dem Sportsfilm „Goal“, dem Drama „Dangerous Parking“ und der Comedy „Botched“ zu sehen.
Auch einige Serien beehrt er mit einem kurzen Besuch, darunter Law & Order: UK, Skins, The Tudors, Luther, Death in Paradise und The Job Lot. Im Jahr 2008 übernahm er eine wiederkehrende Rolle in der Serie The Cop mit Jean Reno und war in drei Episoden der Sherlock Holmes-Serienadaption Elementary zu sehen.
Im Jahre 2014 gehört er als Alfred Pennyworth zum Cast der Serie Gotham.
Im Jahr 1999 heiratete er Jacqui Hamilton-Smith, eine Tochter des britischen Adeligen Anthony Hamilton-Smith. Weihnachten 2001 wurden die beiden Eltern von Zwillingen, von denen einer im April des darauffolgenden Jahres verstarb.